大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒，大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒

上海古朵生物詳細(xì)介紹了大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)，操作步驟，價(jià)格，規(guī)格，品牌，使用說(shuō)明書(shū)等資訊，本司專(zhuān)業(yè)供應(yīng)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒，提供代測(cè)服務(wù)，一周內(nèi)出結(jié)果，所代理的ELISA試劑盒種屬涵蓋有大鼠，小鼠，人，豚鼠，牛，雞，豬，兔，豬，狗，植物及其他動(dòng)物，更多種屬歡迎來(lái)電！

中文名:大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒
別名：大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA Kit
貨號(hào)：fk-m0054
供應(yīng)商：上海古朵
規(guī)格：48t/96t
保存：2-8°
有效期：6個(gè)月
特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好。
用途：科研實(shí)驗(yàn)所用，不作臨床使用。
檢測(cè)原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒  本試劑盒標(biāo)本的采集及保存：
1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃ 后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。


大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒 本試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：
大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒超氧化物歧化酶（SOD）是生物體內(nèi)一種重要的超氧陰離子自由基清除劑，分為CU,Zn-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD3類(lèi)，在生物界分布較廣，其主要作用是能專(zhuān)一地清除生物氧化中產(chǎn)生的超氧陰離子自由基（O2-.），有助于減少和阻止脂質(zhì)的過(guò)氧化反應(yīng)、延緩機(jī)體衰老。

大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA檢測(cè)試劑盒基本原理有三條：
1.抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學(xué)活性；
2.抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。


大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒操作步驟：

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí)，行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。

1. 加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔50μl，注意不要有氣泡。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁。

2. 每孔加酶結(jié)合物50μl。輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)60分鐘。

為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒
4. 依序每孔加底物溶液A和B各50μl，37℃避光顯色（15分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）。

5. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

6. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3． 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請(qǐng)避光保存。
7． 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%

大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞之前，必須根據(jù)以下方向的測(cè)定。
1。貼壁細(xì)胞應(yīng)分離胰蛋白酶和離心后收集（懸浮細(xì)胞將離心收集直接）。
2。洗細(xì)胞三次冷PBS。
3。懸浮細(xì)胞在PBS（1×）和細(xì)胞受超聲處理4次（或≤冷凍細(xì)胞-20°C。用溫和的混融細(xì)胞。3次重復(fù)凍結(jié)/解凍周期。）
4。在1500×g離心10分鐘在2到8攝氏度去除細(xì)胞碎片。細(xì)胞培養(yǎng)上清和其他生物液體在1000×g離心20分鐘去除樣品顆粒和即刻檢測(cè)或者商店樣品在-20°C或稀釋后使用80oC。避免重復(fù)凍結(jié)/解凍循環(huán)。