皮質醇(COR)ELISA試劑盒（猴，牛，雞）組成及試劑配制：
1、酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

皮質醇(COR)ELISA試劑盒（猴，牛，雞）標本要求：
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
3.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可向客服索取說明書
4.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
5.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
6.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
7.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
8.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
9.溫育：操作同3。
10.洗滌：操作同5。
11.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
12. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
13. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。


皮質醇(COR)ELISA試劑盒（猴，牛，雞）注意事項：
1.實驗嚴格按照說明書的操作進行，實牛胰島素受體底物2(IRS-2)ELISA檢測試劑盒驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
2.酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3.建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。
4.若顯色過淺，可適當延長底物溫育時。
5.標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。保存過久可發生聚合在ELISA中可使本底加深。
6.凍結標本溶解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上強烈震蕩。
7.渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。
8.反復凍融會使蛋白效價降低，所以代測樣本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。



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