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脫氫抗壞血酸(DHA)檢測試劑盒(菲咯啉比色法)
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脫氫抗壞血酸(DHA)檢測試劑盒(菲咯啉比色法)

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產(chǎn)品名稱:脫氫抗壞血酸(DHA)檢測試劑盒(菲咯啉比色法)

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產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司

簡單介紹

產(chǎn)品名稱:脫氫抗壞血酸(DHA)檢測試劑盒(菲咯啉比色法)規(guī)格:50T供應(yīng)商:古朵生物分類:生化檢測儲(chǔ)存條件:—20℃,避光,6個(gè)月產(chǎn)品用途:該試劑盒主要用于植物組織中的維生素C(抗壞血酸)的檢測,計(jì)算出總抗壞血酸含量,從中減去樣品中原有的還原型抗壞血酸含量,即得脫氫抗壞血酸含量,

脫氫抗壞血酸(DHA)檢測試劑盒(菲咯啉比色法)的詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱:脫氫抗壞血酸(DHA)檢測試劑盒(菲咯啉比色法)
規(guī)格:50T
供應(yīng)商:古朵生物
分類:生化檢測
儲(chǔ)存條件:—20℃,避光,6個(gè)月
產(chǎn)品用途:該試劑盒主要用于植物組織中的維生素C(抗壞血酸)的檢測,計(jì)算出總抗壞血酸含量,從中減去樣品中原有的還原型抗壞血酸含量,即得脫氫抗壞血酸含量,其優(yōu)點(diǎn)是:1、反應(yīng)穩(wěn)定,不易褪色;2、操作簡便;3、還原糖及其他常見的還原物質(zhì)對實(shí)驗(yàn)沒有干擾,因此專一性好;4、靈敏度高。
注意事項(xiàng):檢測原理是利用還原劑將脫氫抗壞血酸還原成還原型抗壞血酸,在酸性條件下,維生素C(抗壞血酸)把三價(jià)鐵離子還原成亞鐵離子,后者與菲咯啉形成穩(wěn)定的紅色螯合物,以分光光度計(jì)534nm處檢測吸光度,在一定濃度范圍(樣品濃度控制在10~250μg/ml)吸光度與抗壞血酸含量呈線性關(guān)系,獲得抗壞血酸含量。



脫氫抗壞血酸(DHA)檢測試劑盒(菲咯啉比色法)檢測方法:微量法
測定意義:植物酚類物質(zhì)具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
測定原理:在堿性條件下,酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原,產(chǎn)生藍(lán)色化合物,在760nm處有特征吸收峰,測760nm處的吸光值,即可得樣品總酚含量。
需要的儀器,耗材:天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。


脫氫抗壞血酸(DHA)檢測試劑盒(菲咯啉比色法)操作注意事項(xiàng):
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9)按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。


脫氫抗壞血酸(DHA)檢測試劑盒(菲咯啉比色法)特點(diǎn):
1.專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進(jìn)行檢測,免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置.



樣本處理及要求:
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


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